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西安交大保赛供应各种葡聚糖系列凝胶,欢迎咨询采购,促销中.....
促销时间:2014-03-07至2014-06-06        浏览次数:21        

葡聚糖凝胶G-100(Bio-sep G-100)

产品说明

葡聚糖凝胶是一种具有三维网状结构的高分子化合物,它是由葡聚糖加入交联剂环氧氯丙烷通过醚键互相交联聚合而成的,交联度越大,网孔结构就越紧密,吸水后的体积膨胀就越小,能允许进入凝胶内部的分子的分子量也就越小,反之亦然。层析时,大于凝胶孔径的大分子,被阻于凝胶相外,沿着凝胶颗粒之间的间隙走,下移速度最快,故最先洗脱下来,中分子物质部份进入凝胶内部,洗脱速度为其次,而小分子物质因全部进入凝胶,受到阻力最大,故最后被洗脱下来,如此物质得到分离。

1 化学和物理性质

葡聚糖凝胶G-100是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。型号G表明每克于凝胶吸水量的多少,G-100表明每克干凝脱胶吸水10毫升。这表征了凝胶所能膨胀的倍数,亦间接表征了凝胶孔径的大小。 葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

G-100有不同的粒度。颗粒愈细,分离效果愈好,但粒子太细将影响流速,造成洗脱时间过长,易造成生物制品的变质。 反之,粒子太粗则洗脱过快,峰型不集中,分离效果不佳。超细级的葡聚糖凝胶一般用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。另外,粗级也可用于批量工艺。

 

1.1 化学稳定性

葡聚糖凝胶G-100不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。

1.2 物理稳定性

葡聚糖凝胶G-100并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。

2 产品说明

产品名称

粒径(干)

粒径(湿)

溶胀度

应用

G -100

40-120

103-310

15-20

蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定、细胞分离等。

20-50

26-103

特制

40-70

70-160

3 使用方法

3.1 乙醇浸泡

在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,用去离子水洗去残存的乙醇滤干。

3.2 去离子水浸泡

室温下,在去离子水中充分溶胀24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶胀。

3.3 盐酸浸泡

在常温下再用0.2N HCl浸泡12小时,间隙搅拌,滤干,水洗至中性。

3.4 装柱

将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层。

3.5 平衡

上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)

3.6 上样

凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50 cm

以下,过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为5:1即可。

3.7 洗脱方法

可以用去离子水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化。

3.8 在位清洗(CIP)

凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

 

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