生物帮生物通

采购帮忙热线
020-87540820
020-38498013
 

HS Kit

点击图片查看原图
品牌: 东盛
型号: P3082
规格: 1ml*5
单价: 220.00元/包
起订: 1 包
供货总量: 99 包
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
所在地: 广东 广州市
有效期至: 长期有效
浏览次数: 4
询价
公司基本资料信息
 
 
产品详细说明

 

HSTM  Kit

 

 

货号

规格

价格

P3082

1 ml×5(200次,50 μl体系/次)

220

 

 

产品组分

P3082

HSTM PCR Reaction Mix    1 ml         1支×5

Taq DNA聚合酶(2.5 U/μl)160 μl        1支  

注:本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品,PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。

 

保存条件

-20℃保存2年。

请勿保存于-70,防止反复冻融导致酶活降低。

 

产品说明

    HSTM  Kit包含2×浓缩PCR扩增预混和溶液(含有dNTP混合物、缓冲液等)和一支Taq DNA聚合酶。使用时,仅需将反应缓冲液与Taq DNA聚合酶

按比例混合后,在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR,大大简化操作过程,缩短操作时间,降低污染(加样次数减少)同时,由于体系内含有增强剂,

能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有3'-dA突出端。

  Taq DNA聚合酶是嗜热性细菌Thermus aquaticus来源的热稳定重组型Taq DNA聚合酶,分子量为94 KD。扩增片段的长度可达5 kb(简单模板)。延伸速度为0.9-1.2 kb/ min

(70-75 ℃)。该酶具有5'→3'聚合酶活性,无3'→5'外切酶活性。

 

产品特点             

  • 使用方便:仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
  • 快速、高效:减少加样步骤,节约时间。
  • 可重复:降低污染和加样错误风险
  • DNA聚合酶用量灵活可控。

 

产品用途

  • 高通量、高重复性常规PCR检测
  • 制备TA克隆用PCR产物

 

活性定义

    一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃、30 min内,摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

 

质量控制

    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,

扩增活性无明显改变。

 

HSTM Reaction Mix的组分

  50 mM KCl

  20 mM Tris-Cl

  3 mM MgSO4

  0.4 mM dNTP混合物

  溴酚蓝

  dd H2O

 

酶贮存液

  20 mM Tris-HCl

  1 mM DTT

  0.1 mM EDTA

  100 mM KCl

  0.5 % TW 20

  0.5 % NP 40

  50 % Glycerol

 

应用举例

注:以下反应举例为50 μl标准PCR体系,仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化,确定最佳反应条件。

 

以λDNA为模板,扩增1kb片段

 λDNA(2.5 ng/μl)                1 μl

 Primer 1(10 μM )               2 μl

 Primer 2(10 μM)                2 μl

 HSTM PCR Reaction Mix            25 μl

 Taq DNA聚合酶(2.5 U/μl)      0.5 μl

 dd H2O                     补足至50 μl

 

反应条件

95℃        1 min

95℃        30 sec

55~68℃     30 sec    30 Cycles

72℃        1 min

72℃        5 min

 

 

备注:

1  Taq DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性,因此在PCR产物的3'末端通常会加上1个多余的脱氧腺嘌呤核苷。

2  建议在冰上配置PCR 反应液后,再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性,减少非特异性扩增,得到良好的PCR结果。

3  模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)

    人类基因组DNA       0.1 μg ---1 μg

    λDNA                      0.5 ng---5 ng

    质粒DNA                  0.1ng-10 ng

    大肠杆菌DNA         10 ng-100 ng

HSTM Mix的扩增产物经纯化后可直接用于测序反应。

 

Q&A

问:为什么HSTM Mix的特异性会高于PCR Mix?

答:这是由于东盛对HSTM Mix反应缓冲液中的离子浓度等因素进行了优化。PCR引物在不同的离子浓度条件,与模板的结合能力差异显著。经过

优化,HSTM Mix能够显著提高引物与模板结合的严谨性,从而提高PCR扩增的特异性,降低背景。在少数情况下,HSTM Mix的扩增效率可能低于PCR Mix。

 

问:HSTM Mix的扩增产物能否直接进行TA克隆?

答:直接进行TA克隆。

 

 

生物帮站内所有产品仅限于生命科学实验室科学研究使用,不得用于临床诊断及药物治疗。

快速询价
 
更多»本企业其它产品

[ 产品搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ]

 
网站首页 | 企业资料认证流程 | 广告服务 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 网站地图 | 排名推广 | 广告服务 | 网站留言 | RSS订阅 | 粤ICP备11050685号-8
Processed in 0.023 second(s), 8 queries, Memory 1.63 M