【P19；小鼠畸胎瘤细胞】供应P19；小鼠畸胎瘤细胞

P19；小鼠畸胎瘤细胞
细胞编号： C5017
细胞缩写： P19细胞
细胞名称： P19(小鼠畸胎瘤细胞)
详细背景： P19细胞株是从C3H/He小鼠中诱导的恶性畸胎瘤中建立的。该细胞在含有0.1mM 2-巯基乙醇的培养基中可高效率地克隆。该细胞具有多能性，在500nM 维A酸诱导下可以分化成神经和神经胶质样细胞；在0.5%~1.0%二甲亚砜(DMSO) 存在下，分化形成心脏和骨骼肌样细胞，但不形成神经或神经胶质样细胞；在DMSO和维A酸同时存在时，细胞的分化与只有维A酸一样。
细胞来源：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
"购买细胞注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，P19；小鼠畸胎瘤细胞了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。" P4
包装规格：复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
细胞规格： 1*10(5)/ml——1*10（6）/ml
安全水平： 1
细胞种属：小鼠
组织来源：胚胎；畸胎癌
细胞形态：上皮细胞样
细胞特性：贴壁
细胞融合度： 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
"细胞培养三不要：
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：
1. 不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。（当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高）
其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯。
2. 不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长。
3. 不要怕消化。P19；小鼠畸胎瘤细胞在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，37度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。" 详见细胞说明书
传代方法：建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件：详见细胞说明书
主要文献：请具体查阅相关发表文章

实验细胞培养基常见问题总结：

培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分，但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养，这里可蕴含着大大的学问。有时候细胞状态不好，接下来的一系列实验根本就没法做。影响细胞培养的因素很多，那就先从培养基开始说起。

培养基常见问题：

1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件？ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学细胞库收集了绝大多数细胞的详细资料。细胞数据库中有每一种细胞的详细描述，包括细胞的来源，培养和冻存条件，以及相关文献等资料。

2.液体培养基可以放-20℃保存吗？不可以！因为在-20℃下，培养基中的盐容易析出，培养基融化后，有的盐可能无法重新溶解，从而导致培养基渗透压降低，培养细胞时，细胞容易破裂而死亡。

3.自己新配制的液体培养基能保存多久？我们建议将新配制的培养基放置于4℃，避光保存尽量在一周内使用完毕。培养基越新鲜越好。

4.培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗？一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

5.培养基中是否须添加抗生素？除了特殊筛选系统外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。为防止细菌、真菌污染，可以加入青霉素-链霉素双抗溶液，其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml，链霉素为100ug/ml。

6.为何培养基保存于4℃冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值越来越偏碱性？培养基保存于4℃冰箱中，培养基内之CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH值。

7.培养液pH是怎样影响细胞生长的？由于大多数细胞适宜PH值为7.2-7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对PH值要求也不完全相同，原代细胞培养一般对PH值变动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更有利于细胞的生长。因此，配制培养用液时可把液体的PH值稍微调的偏酸一些。液体在经过0.1um或0.2um滤膜过滤时，PH值会向上浮动0.2左右。

8P19；小鼠畸胎瘤细胞.培养液渗透压是怎样影响细胞生长的？当细胞内、外环境的分子浓度不同时就会产生渗透压。这种情况下，水分通过渗透流入或流出细胞，从而改变细胞的内环境。高渗透压迫使水分从细胞中扩散出来导致细胞收缩，这种情况会使DNA和蛋白遭到破坏，细胞周期停滞以及最终使细胞死亡；反之，低渗透压使水分流入细胞内，使细胞肿胀破裂。

9.为什么液体培养基1640有时候颜色发黄，是pH值不对吗？不是。因为配方原因，1640为碱酚红型，其中酚红的浓度只有DMEM的四分之一，所以是因为酚红浓度低，而非PH值低。

10.为什么有客户要求培养基中不含酚红？研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，细胞培养，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加酚红的培养基。CRL-1713 123-28细胞系，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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RCM-1：人直肠腺癌腺	RERF-LC-MS：人肺癌腺	RL：人非霍奇金淋巴瘤	SAS：人舌鳞状细胞癌	SNU-354：人肝癌细胞	SNU-368：人肝癌细胞	SNU-484：人胃癌细胞	SNU-668：人胃癌细胞
SNU-739：人肝癌细胞	SNU-761：人肝癌细胞	SNU-878：人肝癌细胞	SNU-886：人肝癌细胞	T.T：人甲状腺癌细胞	XC：前列腺泡沫状癌	HepA1-6：小鼠肝癌细	U-2OS：人骨肉瘤细胞
MKN45：人胃癌细胞	hFOB 1.19：人SV40转	MC3T3-E1 Subclone 14	C3H/10T1/2,Clone 8：	Hela 229：人宫颈癌细	Y1：肾上腺皮质细胞	COLO-320：结肠腺癌细	DU145：人前列腺癌细

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